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淡竹葉染料法PCR鑒定試劑盒說明書

更新時間:2025-12-05

簡要描述:

淡竹葉染料法PCR鑒定試劑盒說明書公司相關(guān)產(chǎn)品 Esculin Medium 10
70700-30-0 Adenine phosphate 普通肉湯培養(yǎng)基 Broth Medium
24-表油菜素內(nèi)酯78821-43-9 24-Epicastasterone 普通瓊脂 Nutrient Agar
28-表高油菜素內(nèi)酯80483-89-2 Brassilide

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儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品名稱

淡竹葉染料法PCR鑒定試劑盒說明書

英文名稱

lophatheri

貨號

BH-P99425

特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 76,54,3,2
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
小鼠骨髓細胞;FDC-P1 大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞*培養(yǎng)基 100mL腺苷-5'-1酸酯二鈉鹽Adesine 5'-triphosphate (ATP) di salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:美國進口

PATU-8988/FU 人胰腺癌耐藥腺苷 2(3)-1酸混合異構(gòu)體 Adesine 2'(3')-mophosphate mixed isomers 質(zhì)量規(guī)格:美國進口

SEMA6A Others Human Semaphorin-6A / SEMA6A 人細胞裂解液 (陽性對照) 腺苷5'-1酸核糖鈉Adesine 5'-diphosphoribose  salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進口

團頭魴尾鰭細胞;WCF8-疊氮-環(huán)二1酸腺苷-核糖8-Azido-cyclic adesine diphosphate-ribose 質(zhì)量規(guī)格:美國進口

LIFR Others Rat 大鼠 LIFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 8-氨基腺嘌呤核苷8-Ami Adesine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
中國倉鼠卵巢細胞;TPO-CHO-I 瘤細胞,EL4. IL-2細胞 K6H6/B5細胞,鼠雜交骨髓瘤細胞3-羥基地β-D-葡萄糖醛酸苷3-Hydroxy Desloratadine β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口

人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]-d3 Oseltamivir-d3 Acid質(zhì)量規(guī)格:美國進口

MSR1 Others Mouse 小鼠 MSR1 / CD204 / SCARA1 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-氯咪唑并[1,2-b]噠嗪6-Chloroimidazo[1,2-b]pyridazine 質(zhì)量規(guī)格:>98%

成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)1酸腺嘌呤,維生素B4Adenine phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

GLA Others Mouse 小鼠 alpha-Galactosidase A / GLA 人細胞裂解液 (陽性對照)  Hypoxanthine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
S100B Others Human S100B 人細胞裂解液 (陽性對照) (標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Berberine

CL-00074T1(小鼠癌細胞)5×106cells/瓶×2京尼平苷酸質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%Geniposidic acid

EFNA5 Others Rat 大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 人細胞裂解液 (陽性對照) 京尼平苷酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Geniposidic acid

小鼠平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL原兒茶酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品3,4-Dihydroxybenzoic acid

TM3小鼠間質(zhì)細胞 TM3 mouse Leydig cells D-MEM/F-12培養(yǎng)基(GIBCO)+5%馬血清+2.5%FBS鹽酸戊乙奎(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Penehyclidine
淡竹葉染料法PCR鑒定試劑盒說明書人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431]組蛋白H1(小牛胸腺)5

PROC Others Human PROC1 / Protein C / PROC 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,6-二安基本;2,6-本二安; 2,6-二安; 2--1,3-本二安 2,6-DicMitoluqnq;2-Mqthyl-1,3-phqnylqnqdicMinq;2,6-ToluqnqdicMinq;2,6-TolylqnqdicMinq;1,3-DicMi-2-Mqthylbqnzqnq;2-Mqthyl-1,
實驗流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

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